产品名称：BD Leuko Act Cktl 细胞因子刺激剂

产品货号:  550583

产品规格：200 μL

产品品牌：BD

产品简介：

通过细胞内染色检测细胞内细胞因子积累的最关键步骤是分离和激活细胞群，以诱导产生感兴趣的细胞因子。如果没有适当激活的产生细胞因子的细胞，在蛋白质运输抑制剂的存在下培养，检测细胞因子在细胞内积聚的能力在大多数情况下会严重受损。各种体外方法已经报道刺激细胞产生细胞因子。多克隆激活剂在诱导产生细胞因子的细胞方面特别有用。这些激活剂包括以下:炮豆蛋白A、脂多糖、佛波酯加钙离子载体或离子霉素、植物血凝素、葡萄球菌肠毒素B和针对TCR/CD3复合物亚单位的单克隆抗体(含或不含针对共刺激受体的抗体，如CD28)。

PMA (phorbol 12-Myristate 13-Acetate)一种钙离子载体(Ionomycin)和蛋白质运输抑制剂。这种混合物可能被用来诱导来自T细胞的主要细胞因子反应。使用这种鸡尾酒刺激细胞会产生细胞因子，这些细胞因子位于细胞因子产生细胞的粗面内质网中。这种细胞因子的定位是由蛋白质运输抑制剂成分Brefeldin A引起的，它可以阻断细胞内蛋白质运输过程。细胞中细胞因子蛋白水平的增加。每100μL小瓶的内容物足以处理多达50 mL的细胞培养物(在~10^6细胞/mL);因此可刺激≥5 × 10^7细胞。

准备和存储

在使用前将产品储存在-80°C或长期存储库存溶液。

推荐的试验程序

使用GolgiPlug:在水浴中在37°C快速解冻鸡尾酒，每1 mL细胞培养(例如，~10^6细胞/mL)加入2μL的鸡尾酒，并 混合。将培养物置于37°C湿化CO2培养箱中4-6小时。

活化后，用FACS染色缓冲液(如 Pharmingen染色缓冲液、胎牛血清，用于抗体染色。

用白细胞激活鸡尾酒 受刺激的细胞4至6小时，BD GolgiPlug通过免疫荧光染色显著提高检测细胞因子产生细胞的能力。推荐GolgiPlug的白细胞激活鸡尾酒在细胞培养中保存时间不超过12小时。

GolgiPlug被发现对细胞内细胞因子染色有不同的影响，是时间、激活剂和细胞因子依赖的，因此研究人员可能根据经验确定激活细胞超过4-6小时的需要。

产品订购信息：

货号             名称                                             规格

550583  Leuko Act Cktl 细胞因子刺激剂    2×100 μL

关于公司：

BD 多色流式细胞术提供了各种目标细胞亚群的快速、多参数分析。其应用包括免疫学、免疫学、病毒学、免疫监测等。BD Biosciences开发了跨越每条激光线的创新染料，以提供多色实验方案设计灵活性和全面的偶联抗体组合，帮助深度表征表面、细胞内或分泌标记物。从简单到复杂研究应用的流式细胞仪和分选仪，到广泛的试剂选择和教育资源、工具和方案的全面收集，我们支持您有效地管理多色流式细胞仪工作流程。