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MIGRATEST™ 试剂盒 BD货号 341059 现货供应！！!
产品名称：MIGRATEST™
产品货号：10-0800
产品描述：
该测试允许流式细胞术定量测定嗜中性粒细胞的趋化功能。与Boyden chamber技术类似，该试剂盒包含用于趋化性研究的多孔板和预包覆的细胞培养插入物、化学肽N-formyl-Met-Leu-Phe (fMLP)、抗体试剂、计数珠和必要的试剂。它允许测定通过细胞培养插入向趋化剂fMLP的浓度梯度迁移的中性粒细胞的数量。同时，通过分析细胞正向散射谱的变化，可以分析细胞粘附分子l -选择素表达的减少和细胞形态的变化。
准备和存储：将工具放在暗处2-8处(冰箱)。细胞培养插入物和多壁板可在室温下保存。试剂C和E工作液使用后需弃用。试剂中提供了不影响嗜碱性粒细胞趋化功能的防腐剂。当按说明储存时，这些试剂在包装标签上显示的时间内是稳定的。
过程
1. 准备工作:1.1用B试剂稀释原溶液- C试剂，1:200(体积根据需要，如5 ul / 1ml，每次试验350 ul)。试剂E, 1:50(例如:5 ul / 250 ul)每项测试20 ul)。1.2水浴预热至37摄氏度(温度精确控制!)1.3准备冰浴1.4流式细胞仪开机校准。
2. 白细胞隔离:从每位患者和对照组中采集5 ml肝素化全血，用标准无菌技术采集血液。不要使用EDTA或柠檬酸抗凝血!2.1将1ml肝素化全血小心覆盖于A试剂上。2.2小瓶放置在室温下不动。40分钟后形成以下阶段:上层包含白细胞和血小板(白细胞蛋白丰富的血浆=LRP)和下层包含红细胞。使用较旧的血样时，红细胞的沉淀需要较长的时间。2.3删除约。白细胞增多血浆(上期)500 ul。将cel悬液移入一个1ml或2ml的试管中。分离的细胞应在1小时内用于趋化性分析。
3.MIGRATESTTM设置:3.1将试剂B或试剂C工作液滴入多孔板的两孔中，为eac患者或对照组准备以下样品:负控制样品试剂B的350ul阳性对照(试验)样品:试剂C工作溶液的350ul3.2将细胞培养插片放入双孔。在每个细胞培养液中加入100 ul的富白细胞血浆。3.3培养:多孔板在37℃水浴中孵育30分钟，不使用shakinq。3.4在孵育时间结束时，手动将细胞培养插入物从多孔板中取出。从多向板的两个孔中加入细胞悬浮液到两个单独的5毫升试管(试管1和试管2)，并将试管放在冰上。此外，来自富含白细胞血浆的未受刺激的细胞可以作为l -选择素的对照。为此，将20 ul的cel悬液从阴性对照样品的细胞培养瓶中与180 ul的试剂B混合，并将该混合物转移到第三个5 ml的试管中(试管3)3.5用D试剂标记:每管添加20 ul试剂D(每个患者3管)。漩涡和孵化管10分钟的冰浴，cov。防止暴露在阳光下3.6活体染色:每管加入1 x试剂E 20 ul，混合并在冰浴中光照保护5分钟。测量细胞悬液在120分钟内
4. 流仪分析:使用蓝绿激发光(488 nm氩离子激光，e.q..)流式细胞术分析细胞。FACSCaliburrM CellQuestnM软件)
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