在使用ProteanFect CRISPRMax Ultra转染试剂盒时，如何提升原代细胞转染效率？转染后细胞沉淀不明显怎么办？本文汇总高频问题，助您快速优化实验！

Q1：转染效率低如何解决？
A：建议延长孵育时间（原代细胞≤30分钟）或增加1.5-2.5倍转染体系。同时，确保细胞活性＞90%并优化RNP摩尔比（Cas9:sgRNA=1:1-1:2.5）。

Q2：小体积转染后看不到细胞沉淀？
A：此为正常现象，细胞可能附着于管壁。移液时避免触碰管底，减少细胞损失。

Q3：能否同时转染多个sgRNA？
A：可以！96孔板体系中，sgRNA总量需≥10 pmol（浓度≥1 μg/μL），确保高效编辑。

Q4：贴壁细胞如何操作？
A：可选择消化为悬液转染（如表2），或提前种板后直接添加转染混合液。

更多技巧（如原代细胞活化、EGFP对照使用）可参考说明书或联系华雅思创生物：15021010459。

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