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Takara双链cDNA合成试剂盒 PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit 组成及特点
2024-05-30
Takara双链cDNA合成试剂盒 PrimeScript? Double Strand cDNA Synthesis Kit
引言
随着合成生物学的快速发展，cDNA合成在基因表达分析、克隆和高通量测序等研究中变得至关重要。Takara双链cDNA合成试剂盒 PrimeScript? Double Strand cDNA Synthesis Kit 作为一款高效、可靠的试剂盒，广泛应用于各种生物学研究领域。本文将详细介绍该试剂盒的技术特点、使用方法及其在合成生物学中的应用优势。
试剂盒组成及特点
Takara PrimeScript? Double Strand cDNA Synthesis Kit 包含以下组分：
PrimeScript?反转录酶**：一种高效且高保真的反转录酶，能快速将RNA模板转录为cDNA。
随机引物和寡(dT)引物**：提供两种引物选择，适应不同实验需求。随机引物适用于全长cDNA合成，寡(dT)引物则用于Poly(A)尾mRNA的特异性合成。
dNTP混合物**：平衡的四种脱氧核糖核苷酸，确保DNA链延伸的稳定性。
反应缓冲液**：优化的反应环境，提高酶活性和反应效率。
RNase H**：在第一链cDNA合成后去除RNA模板，确保双链cDNA合成的完整性。
技术优势
1. **高效性**：PrimeScript?反转录酶具有高效的RNA到cDNA的转录能力，大幅提升cDNA合成的效率。
2. **高保真度**：该试剂盒合成的cDNA具有极高的保真度，确保后续实验数据的准确性和可靠性。
3. **应用广泛**：适用于基因克隆、qPCR、NGS文库构建等多种合成生物学研究。
4. **品牌信赖**：作为全球知名的生物技术公司，Takara提供的试剂盒质量可靠，性能稳定。
使用方法
**第一链cDNA合成**
1. 将1 μg总RNA、1 μL随机引物或寡(dT)引物、适量dNTP和PrimeScript?反转录酶加入反应体系，最终体积为20 μL。
2. 反应体系在42°C孵育60分钟。
3. 加热至70°C，保持15分钟终止反应。
**第二链cDNA合成**
1. 向第一链cDNA合成反应体系中加入适量dNTP、RNase H和反应缓冲液，最终体积为50 μL。
2. 反应体系在16°C孵育2小时，随后加入酶反应终止液。
**纯化和应用**
1. 通过酚-氯仿抽提和乙醇沉淀的方法纯化双链cDNA。
2. 纯化后的双链cDNA可直接用于PCR扩增、基因克隆或NGS文库构建。
应用实例
**基因表达分析**
使用Takara PrimeScript? Double Strand cDNA Synthesis Kit合成的cDNA，可用于定量PCR（qPCR）分析基因表达水平。其高效性和高保真度确保了qPCR结果的准确性。
**高通量测序（NGS）**
合成的双链cDNA可用于构建NGS文库。试剂盒合成的cDNA质量高，适合后续高通量测序，助力复杂基因组和转录组的深入研究。
Takara双链cDNA合成试剂盒 PrimeScript? Double Strand cDNA Synthesis Kit 以其高效性、高保真度和广泛的应用范围，成为合成生物学研究中的理想选择。通过使用该试剂盒，科研人员可以高效、准确地完成cDNA合成，为后续的分子生物学研究提供可靠的数据支持。作为Takara授权代理商，华雅思创生物为广大科研人员提供优质的产品和专业的技术支持，助力科学研究的顺利进行。
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