分子生物学的发展使得大量致病基因被鉴定, 科学家在这些研究成果的基础上发展了基因治疗。 基因治疗是利用基因载体将治疗基因导入患者体 内,进而表达功能蛋白以达到治疗的目的 。 基因 治疗传递 DNA 面临的挑战之一是外源治疗基因会 被体液和胞外空间的核酸内切酶降解。治疗基因在目标组织中的选择性积累、细胞内化以及从溶酶体 逃逸这些问题对所有核酸治疗剂都是需要克服的。DNA 必须输送至细胞核以允许获得转录和表达 。因此,设计和制备安全高效的基因载体来压缩并且 保护治疗基因以免被核酸内切酶降解并延长其在体 内的循环时间显得尤为重要。目前,基因载体主要分为两大类:病毒载体和非病毒载体。
最初受到重视的基因载体是病毒,因为其具有较高的转染效率。 理论上,病毒载体转染效率为 100% 。
随着病毒载体安全性和有效性的改进,基因和细胞治疗药物的研发生产正逐渐增多。腺相关病毒(AAV)和慢病毒 常用于治疗(如car-T技术需要病毒包装过程),通常使用PEI(聚乙烯亚胺)瞬时转染HEK-293或 HEK-293T来产生。阳离子聚合物 - 聚乙烯亚胺(PEI)是目前报道的工业化、大规模瞬时转染表达重组蛋白领域最广泛使用的基因载体和转染试剂。这种聚阳离子能将各种报告基因转入各种种属细胞,其效果好于脂质聚酰胺,而且细胞毒性低。大量实验证明,PEI是非常有希望的基因治疗载体。目前在设计更复杂的基因载体时,PEI经常做为核心组成成分。
PEI转染机制
PEI 制备简单,价格便宜,有线状和枝状两种商业试剂可选,是瞬时转染放大转染试剂的不二选择,是非常有潜力的非病毒质粒载体试剂。
由于PEI 带正电荷,与带负电荷的DNA 结合形成带正电荷的 PEI-DNA 复合物,可以与带负电荷的细胞表面结合。PEI-DNA 复合物通过胞吞作用进入细胞内部形成内涵体,之后一部分从内涵体中逃逸进入细胞核内,未逃逸的进入溶酶体被降解,无法入核的 DNA 会在 100 min 内被胞浆中的 DNA 酶降解。
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产品特点
高效、无毒:转染效率高,重复性好,无明显的细胞毒性;
操作简单:使用方法和市面常见同类产品完全一致;
应用广泛:贴壁细胞和悬浮细胞都适用,即可瞬时转染,也可稳定转染
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品牌 | 货号 | 规格 |
SEROCHEM | PRIME-P100-1G | 1g |
SEROCHEM | PRIME-P100-100MG | 100mg |
SEROCHEM | Prime-AQ100-100ML | 100ml |
SEROCHEM | Prime-AQ100-5ML | 5ml |
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